1.泵頭密封圈的磨損

　　2.進樣閥轉(zhuǎn)子密封圈的磨損

　　3.析出的緩沖鹽

　　4.樣品中的復雜易吸附基質(zhì)

　　其實，在工作過程中大多數(shù)的顆粒物堵塞導致的色譜柱背壓升高問題是體現(xiàn)在柱頭堵塞。而樣品的易吸附機制也可能會和柱前端的硅膠表面游離的硅醇基發(fā)生作用導致色譜柱背壓升高。但是這種情況在較低的PH系統(tǒng)中會有所改善，因為較低的PH系統(tǒng)會降低硅膠表面的硅醇基發(fā)生解離。

　　液相色譜柱如何預防損壞措施

　　1、在液相系統(tǒng)中加入在線過濾器

　　在線過濾器的內(nèi)部顆粒空隙一般是0.5微米，對于UHPLC會選擇0.2微米空隙的在線過濾器。這個空隙尺寸和柱頭的過濾篩板尺寸接近或者略小。

　　所以，在線過濾器能夠有效的阻隔來自樣品、泵頭密封墊、自動進樣器的轉(zhuǎn)子密封墊的顆粒物，以防止柱頭過濾篩板的堵塞。

　　注意：但是對于非常低死體積的液相系統(tǒng)，在線過濾器的加入可能會導致系統(tǒng)死體積增大峰展寬變嚴重的問題。而對于大多數(shù)的液相系統(tǒng)而言，色譜圖不會有太大變化。

　　2、在柱子前端使用保護柱

　　保護柱有很多種，通用型、一體式、卡套式，但是它其實是一個和分析柱固定相相同的10-20mm的小柱子。

　　因為它具有和分析柱相同的內(nèi)部填料，所以保護柱不僅可以阻隔顆粒物，還可以阻隔易吸附的樣品基質(zhì)組分。

　　注意：由于保護柱中可能有大量的強保留組分，在用強溶劑清洗系統(tǒng)時請取下保護柱，以防止這些強保留組分被洗脫進分析柱。保護柱如果出現(xiàn)吸附飽和也可能會對分離效果有影響

　　3、對樣品進行凈化處理

　　有一些液相的分析方法沒有明確標注樣品的凈化，但我希望大家在做分析時都能夠考慮樣品的凈化，常用的方案是對樣品進行過濾。

　　在實際工作中，色譜柱的儲存也會影響柱子的使用壽命。那么對于色譜柱的儲存，也有以下建議：

　　短期儲存時

　　應該保存在接近常用的流動相條件下。并且，一定要移除系統(tǒng)中的緩沖鹽、酸等。

　　長期儲存時

　　將色譜柱按照說明書的要求保存在對應的溶劑中，并且將色譜柱從系統(tǒng)中取下兩頭用堵頭堵死。